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QUANDO
UTILIZZARE DIKE ?
Durante un esperimento per rilevare una
reazione di affinità su materiale
biologico, una molecola di interesse viene
attaccata al cristallo di quarzo del canale
di misura, questa deposizione può
essere ottenuta con un legame diretto o
tramite la cattura attraverso un'altra proteina,
il risultato di questo processo è
quello di rendere il quarzo sensibile alla
molecola da rilevare.
Dopo
questa fase il campione biologico da analizzare
viene sottoposto ad una serie di opportune
operazioni affinchè la reazione di
affinità avvenga, alcune di queste
operazioni prevedono dei cambiamenti di
temperatura ma, essendo il quarzo molto
sensibile alla temperatura, diventa estremamente
difficile separare la risposta dovuta al
cambiamento di temperatura da quella dovuta
alla reazione di affinità, e spesso
non è possibile lavorare a temperatura
costante specialmente quando si lavora con
campioni biologici.
Dike
può ovviare a questo problema poichè
ha due canali di ingresso e può lavorare
con due cristalli di quarzo: la molecola
di interesse viene immobilizzata su di un
cristallo di quarzo utilizzato come canale
di misura, mentre l'altro cristallo di quarzo
sul secondo canale viene utilizzato senza
l'immobilizzazione della molecola di interesse,
in questo modo si comporta come un canale
di riferimento.
Il
canale di misura risulta sensibile ai cambiamenti
di temperatura e alla reazione di affinità,
mentre il canale di riferimento è
sensibile solo ai cambiamenti di temperatura
poichè la reazione di affinità
non può avere luogo in quanto sulla
sua superficie non è presente la
molecola di interesse immobilizzata.
Con
questo approccio è possibile rilevare
la reazione di affinità semplicemente
sottraendo la risposta del canale di misura
a quella del canale di riferimento, in quanto
entrambi i canali presentano la stessa risposta
ai cambiamenti di temperatura mentre il
solo canale di misura è sensibile
alla reazione di affinità.
Questo
approccio differenziale utilizza due canali
per rilevare la reazione di affinità
e per eliminare la risposta del cristallo
di quarzo a tutte le variazioni delle condizioni
sperimentali.ave the same response
for temperature nnel is s
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